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[发明专利]一种实时荧光恒温扩增检测m6A的方法与应用-CN202310140984.2在审
发明人：王红胜;吴优;钟科;黎婕昕 -专利权人：中山大学
申请日： 2023-02-21 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明提供了一种实时荧光恒温扩增检测m6A的方法与应用，属于生物检测技术领域。本发明提供一种实时荧光恒温扩增检测m6A的方法，本发明的实时荧光恒温扩增检测m6A的方法简便易操作，可在一个反应体系中完成扩增步骤且扩增条件易实现；本发明的实时荧光恒温扩增检测m6A的方法准确度高、差异明显，无假阳性结果，能使待测物中含m6A修饰的RNA的荧光值远高于不含m6A修饰的RNA的荧光值，荧光值差异可达10倍以上；本发明的实时荧光恒温扩增检测m6A的方法应用范围广，可用于包括mRNA，lncRNA，rRNA在内的多种RNA的m6A修饰的检测，也可用于m6A相关酶抑制剂筛选。
一种实时荧光恒温扩增检测 m6a 方法应用

[发明专利]一种基于Nanopore测序的m6A分析方法-CN202110418078.5在审
发明人：郑洪坤;聂佩瑶;刘敏;张雪川 -专利权人：北京百迈客生物科技有限公司
申请日： 2021-04-19 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： G16B20/30 文献下载
摘要：本发明涉及表观遗传学领域，具体涉及一种基于Nanopore测序的m6A分析方法。所述分析方法可鉴定4种模式(AGACT、GGACA、GGACC、GGACT)下的m6A位点，可以检测CLIP无法检测到的m6A位点，且有较高的准确率。基于鉴定得到的m6A位点，分析m6A位点在mRNA功能元件上的分布以说明其分布的偏好，分析m6A位点甲基化水平的分布以说明其模式偏好，分析转录本水平的甲基化水平分析，可以结合mRNA表达研究其表达偏好。同时，基于鉴定得到的m6A位点，可以分析不同处理样本之间的差异m6A情况。
一种基于 nanopore m6a 分析方法

[发明专利]m6A的结合蛋白及其应用-CN202211662378.9在审
发明人：高关刚;房郁坤;陈红凯;李帅;袁三跃;卢轶;宋秀丽 -专利权人：杭州华安生物技术有限公司
申请日： 2022-12-23 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C07K16/44 文献下载
摘要：本发明提供了一种m6A的结合蛋白及其应用，涉及生物技术领域。本发明提供的m6A的结合蛋白，所述结合蛋白的可变区包括：具有特定氨基酸序列的互补决定区CDR1‑VH、CDR2‑VH、CDR3‑VH、CDR1‑VL、CDR2‑VL和CDR3‑VL。该m6A的结合蛋白，能够特异性识别m6A，与m6A亲和力高，能够用于m6A检测产品的制备。
m6a 结合蛋白及其应用

[发明专利]一种m6A修饰RNA检测方法及用途-CN201910025924.X在审
发明人：付汉江;郑晓飞;苏晨 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2019-01-11 - 公布日： 2020-07-21 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测生物或医学样品中m6A修饰RNA的方法。该方法的特征在于其是基于利用YTHDF2蛋白结合RNA分子m6A的特性，分离带有m6A修饰的RNA分子，进而通过PCR扩增技术检测m6A修饰的RNA分子。本方法可以用于生物或医学样品中m6A修饰RNA的检测分析。
一种 m6a 修饰 rna 检测方法用途

[发明专利]猪脂肪沉积相关PNPLA2mRNA m6A甲基化位点的鉴定方法和功能应用-CN201710760330.4有效
发明人：汪以真;王新霞;江芹;吴睿帆;姚永曦;蔡旻;刘卿 -专利权人：浙江大学
申请日： 2017-08-30 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：猪脂肪沉积相关PNPLA2 mRNA m6A甲基化单位点的鉴定方法，根据m6A‑seq测序得到的是100nt左右的片段中存在m6A甲基化位点，其特征在于：根据甲基化高度保守的RRACH(R＝G,A；H＝A,C,T)序列进行PNPLA2基因的m6A单位点位置的确认。本发明通过生物信息学分析，根据m6A的保守序列，鉴定了m6A的具体位点；本发明提供了在猪中鉴定PNPLA2 mRNA m6A甲基化水平的引物序列和具体方法；本发明通过基因单位点突变改变PNPLA2 m6A水平证明了PNPLA2 m6A位点对脂肪沉积的影响的功能。
脂肪沉积相关 pnpla2mrna m6a 甲基化鉴定方法功能应用

[发明专利]一种m6A修饰的新生RNA捕获及文库构建方法-CN202210919993.7在审
发明人：尹世刚;张锦玥;江勇;彭建华 -专利权人：西南医科大学附属医院
申请日： 2022-08-01 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明公开了一种m6A修饰的新生RNA捕获及文库构建方法，属于生物技术领域。其捕获方法主要包括新生RNA标记和m6A修饰的新生RNA捕获步骤，其中，新生RNA标记过程包括对RNA进行体外转录，所述转录过程加入试剂包括5‑乙炔基尿苷，转录后提取RNA，采用点击化学技术对新生的RNA采用两轮特异性磁珠对m6A修饰的新生RNA进行捕获。超声打断RNA，打断后采用包被m6A抗体的磁珠捕获m6A修饰的RNA；采用链霉亲和素磁珠从m6A修饰的RNA产物中捕获新生RNA产物。本发明能够监控全基因组范围内新生RNA发生m6A修饰过程，以及m6A对新生转录本的调控过程。
一种 m6a 修饰新生 rna 捕获文库构建方法

[发明专利]检测RNA m6A修饰引起的免疫反应的方法-CN202211430449.2在审
发明人：潘文琦 -专利权人：潘文琦
申请日： 2022-11-16 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：检测RNA m6A修饰引起的免疫反应的方法。本发明属于分子生物学领域，提供了一种体外检测含有N6‑甲基腺嘌呤(N6‑methyladenosine，m6A)修饰的RNA引起的免疫反应的方法及其应用.本发明基于体外获得的含有与不含有m6A修饰的RNA片段，并通过检测转染不同RNA片段在体外模型中引起的相关免疫因子表达水平的变化来评估m6A修饰对RNA免疫原性的影响.该方法帮助我们在体外快速准确的判断m6A修饰对RNA免疫反应性的影响，有助于对m6A
检测 rna m6a 修饰引起免疫反应方法

[发明专利]miRNA对m6A修饰水平的调控方法及其应用-CN201580074289.4有效
发明人：周琪;杨运桂;王秀杰;陈同;张映;郝亚娟;李苗苗;王猛 -专利权人：中国科学院动物研究所;中国科学院北京基因组研究所;中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2015-01-26 - 公布日： 2020-07-10 - 主分类号： C07H21/02 文献下载
摘要：公开了一种miRNA对RNA分子上的6‑甲基腺嘌呤(N6‑methyladenosine,m6A)修饰水平的调控方法及相关的进一步应用。通过提高或降低miRNA可以相应的提高或者降低m6A修饰水平，并进一步调节m6A修饰介导的功能。还公开了一种通过调节m6A而影响细胞重编程的调节方法及其利用的调节剂。
mirna m6a 修饰水平调控方法及其应用

[发明专利]一种基于m6A甲基化测序研究泡桐丛枝病的方法-CN202111386710.9在审
发明人：范国强;翟晓巧;王哲 -专利权人：河南农业大学
申请日： 2021-11-22 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12Q1/6809 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于m6A甲基化测序研究泡桐丛枝病的方法，属于分子生物学领域；包括下述步骤：(1)提取泡桐总RNA；(2)m6A测序：利用泡桐总RNA构建m6A文库，进行测序；(3)转录组测序：利用泡桐总RNA构建转录组文库，进行测序；(4)生物信息学分析：对m6A测序结果进行Peak分析，绘制出白花泡桐m6A修饰图谱，并基于Peak分析结果进行m6Amotif预测；对转录组测序结果进行转录组分析；进行m6A与转录组的关联分析，筛选出泡桐丛枝病相关基因。
一种基于 m6a 甲基化研究泡桐丛枝病方法

[发明专利]猪脂肪沉积相关UCP2 mRNA m6A甲基化单位点的鉴定方法和功能应用-CN201710760315.X有效
发明人：王新霞;汪以真;江芹;吴睿帆;姚永曦;蔡旻;刘卿 -专利权人：浙江大学
申请日： 2017-08-30 - 公布日： 2020-12-22 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：猪脂肪沉积相关UCP2 mRNA m6A甲基化单位点的鉴定方法，根据m6A‑seq测序得到的是100nt左右的片段中存在m6A甲基化位点，其特征在于：根据甲基化高度保守的RRACH(R＝G,A；H＝A,C,T)序列进行UCP2基因的单位点位置的确认。通过生物信息学分析，根据m6A的保守序列，鉴定了m6A的具体位点；提供了在猪中鉴定UCP2 mRNA m6A甲基化水平的引物序列和具体方法；通过基因单位点突变改变UCP2 m6A水平证明了UCP2 m6A
脂肪沉积相关 ucp2 mrna m6a 甲基化单位鉴定方法功能应用

[发明专利]一种RNA分子m6A修饰水平检测方法及用途-CN201910025925.4在审
发明人：郑晓飞;付汉江;苏晨 -专利权人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
申请日： 2019-01-11 - 公布日： 2020-07-21 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测生物或医学样品中RNA m6A修饰水平的方法。该方法的特征在于其是基于利用YTHDF2蛋白结合RNA分子m6A的特性，以干扰反转录酶对RNA分子的反转录反应，进而通过PCR扩增技术检测特定位点m6A修饰的特定RNA分子。本方法可以用于生物或医学样品中m6A修饰的RNA分子的检测分析。
一种 rna 分子 m6a 修饰水平检测方法用途

[发明专利]一种RNA甲基化m6A检测方法及试剂盒-CN202010693177.X在审
发明人：林锦梅;陈少锐 -专利权人：广州烨善生物科技有限公司
申请日： 2020-07-17 - 公布日： 2020-11-03 - 主分类号： C12Q1/6804 文献下载
摘要：本发明涉及一种RNA甲基化m6A检测方法及试剂盒。本发明的检测方法采用抗体捕获和RNA逆转录相结合的方法，利用逆转录过程中以RNA为模板合成DNA的过程，针对目标基因m6A位点区域，设计特异寡核苷酸引物并偶连生物素检测指定基因m6A水平，及随机引物检测总RNAm6A水平。利用被m6A抗体捕获的RNA片段结合，并用带有HRP标记的链霉亲和素结合生物素进行二级信号放大，通过TMB显色检测吸光度并计算得到目标基因m6A的水平。本发明首次提供了一种不完全依赖抗体免疫酶联的系统性检测m6A的方法，具有高效、灵敏等优点，同时检测成本低、操作简便、适用于多种RNA样本，解决了传统检测方法分辨率有限、无法进行m6A定量、RNA样本需求量大的问题
一种 rna 甲基化 m6a 检测方法试剂盒

[发明专利]微量m6A的检测文库构建方法和试剂盒、高通量检测方法-CN202110543274.5在审
发明人：张好建;印容;常继伟 -专利权人：武汉大学
申请日： 2021-05-19 - 公布日： 2021-08-27 - 主分类号： C12Q1/6804 文献下载
摘要：本发明提供了一种微量m6A的检测文库构建方法和试剂盒、高通量检测方法，所述构建方法包括：将总RNA产物采用m6A抗体进行免疫共沉淀，获得m6A修饰RNA产物；将所述m6A修饰RNA产物采用逆转录酶、oligoID NO：2所示)进行逆转录，获得cDNA第一条链产物；将所述cDNA第一条链产物采用ISPCR引物(如SEQ ID NO：3所示)进行PCR扩增和纯化，获得全长的转录组cDNA；后文库构建，获得微量m6A对文库进行高通量测序，获得微量m6A的检测结果，将总RNA需求量从100μg降低至100ng，成本较低。
微量 m6a 检测文库构建方法试剂盒通量

[发明专利]一种基于CRISPR/Cas13a融合蛋白的RNA甲基化编辑工具-CN202210887284.5在审
发明人：常晨;何安竹;马刚 -专利权人：南方科技大学
申请日： 2022-07-26 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：设计并构建了Cas13a融合蛋白的瞬转载体及慢病毒载体，可以定点检测m6A丰度的环状RNA载体，以及所述单U6启动子介导的多crRNA表达载体。实现了在普通细胞系或困难表达的胚胎干细胞中在不影响全转录组m6A水平的前提下对单个RNA把靶向及m6A的精准且高效的编辑，大大提高了m6A研究的精确性以提高了基于m6A的编辑来实现对基因表达、RNA稳定性、基因组结构的可靠性，同时提高了通过对m6A的编辑来实现表观遗传治疗的可行性。
一种基于 crispr cas13a 融合蛋白 rna 甲基化编辑工具

[发明专利]m6A RNA甲基化位点检测方法-CN202111653794.8有效
发明人：程敏;秦伟伟;林海军;陈静;李志;孔关义 -专利权人：北京恩泽康泰生物科技有限公司
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-04-19 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明提供一种m6A RNA甲基化位点检测方法，属于分子生物学领域。本发明是专门针对低起始量总RNA检测m6A位点的方法，整个实验过程简捷，RNA完整性高，文库质量好，尤其适用于临床样本起始量少的情况，可实现高效m6A甲基化RNA获取，通过去rRNA链特异性建库最终得到浓度足够高的文库，完成上机测序和后续的测序相关的应用，有效实现临床微量样本和珍贵临床样本mRNA和IncRNA中m6A甲基化位点的识别，可应用于机制探讨、诊断治疗等领域m6A甲基化的研究。
m6a rna 甲基化检测方法

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